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Diferenciación fenotípica, molecular y perfil de sensibilidad antifúngica de Candida albicans y Candida dubliniensis aisladas de pacientes ambulatorios y hospitalizados

Carolina_Dure-tesis.pdf (2.106Mb)
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RISMendeleyRefworksZotero
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URI
http://hdl.handle.net/20.500.14066/3944
Metadata
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Author(s)
Duré Paredes, Carolina PaolaCONACYT Authority
Adviser
Samudio Acevedo, MargaritaCONACYT Authority
Date of publishing
2021
Type of publication
master thesis
Subject(s)
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
ANTIFUNGICOS
CANDIDA ALBICANS
CADENA DE POLIMERASA
 
Abstract
Las levaduras del complejo Candida albicans son prevalentes en infecciones oportunistas. Candida dubliniensis y Candida albicans son especies estrechamente relacionadas y su diferenciación fenotípica se dificulta por métodos convencionales. Objetivo: Diferenciar fenotípica, molecular y perfil de sensibilidad antifúngica de cepas de Candida albicans y Candida dubliniensis aisladas de pacientes ambulatorios y hospitalizados de diferentes servicios de salud de Asunción, Paraguay. Metodología: Se incluyeron levaduras aisladas de materiales respiratorios, cavidad bucal, orina, sangre y secreciones varias. Los aislamientos subcultivados en agar Sabouraud y agar Cromogénico Candida (CONDA® pronadisa, España), fueron incubados a 35 °C durante 48 h; las colonias de color verde en el medio cromogénico, presuntivo de las especies C. albicans/C. dubliniensis fueron sometidas a la PCR dúplex, utilizando cebadores específicos CAL y CDU. El ADN se extrajo utilizando el kit Wizard® Genomic DNA (PROMEGA) con algunas modificaciones. La sensibilidad a fluconazol, voriconazol, anfotericina B, flucitosina, caspofungina y micafungina se determinó por VITEK® 2 a un subgrupo de aislamientos. Resultados: La PCR dúplex se estandarizó con éxito siendo el límite de detección de 10.10-4 ng/µL. De 1090 aislamientos, 846 (77,6 %) fueron C. albicans y 2 (0,2 %) C. dubliniensis, estos últimos aislados provenientes de cavidad bucal, uno de un paciente inmunocompetente y otro de inmunocomprometido; los 242 restantes fueron negativos para ambas especies. El 95,6 % de 512 aislamientos de C. albicans fueron sensibles a fluconazol, 91,2 % a voriconazol, 99,0 % a anfotericina B, 96,9 % a flucitosina, 100 % a caspofungina y micafungina. Las dos cepas de C. dubliniensis presentaron CIM de ≤ 0,5 µg/mL a fluconazol, ≤ 0,12 µg/mL a voriconazol y ≤ 0,25 µg/mL a anfotericina B. Conclusión: La frecuencia de C. dubliniensis es baja con relación a otros estudios que informan 1,5 a 32 %. C. albicans mostró alta sensibilidad a los antifúngicos. No se obtuvo indicios de resistencia en las dos cepas de C. dubliniensis.
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