Comparación de técnicas moleculares de detección del virus del papiloma humano en muestras cervicales de mujeres paraguayas

Abstract

El virus del papiloma humano (VPH) es causa necesaria pero no suficiente del cáncer de cuello uterino (CCU), cuarta causa de muerte en mujeres a nivel mundial. En nuestro país, la incidencia y mortalidad de CCU es de 30,6 y 16,7 por 100.000 mujeres, respectivamente; siendo un problema de salud pública. Los VPH son de alto riesgo oncogénico (VPH-AR), asociados a neoplasia intraepitelial cervical (NIC) y bajo riesgo oncogénico (VPH-BR), relacionados a verrugas genitales. El objetivo fue comparar dos pruebas diagnósticas de detección de VPH, PCR en tiempo real y PCR seguida de hibridación reversa, en la población estudiada. Se seleccionaron 218 muestras cervicales de mujeres paraguayas analizadas por PCR en tiempo real (Abbott), luego por PCR seguida de hibridación reversa (CLART HPV2) que detecta 35 tipos de VPH. Por este último método los tipos más frecuentes en infecciones simples fueron VPH-16 y VPH-18, de los VPH-AR. Dentro de los VPH- PAR (Probable Alto Riesgo) VPH-53 fue el más detectado y dentro de los VPH-BR, VPH-84. El VPH-6 (de BR) se detectó solo en una muestra en forma simple y en 3 infecciones múltiples. La concordancia para detección de VPH-AR, comparando ambos métodos, fue 78,44 %, con coeficiente kappa de 0,50; IC 95% (0,38-0,62), similar a lo reportado en estudios de otros países. Este estudio aporta datos de PCR seguida de hibridación reversa como apoyo al tamizaje por PCR en tiempo real ya que la genotipificación monitorea infecciones tipo especificas persistentes que causan NIC contribuyendo a estudios epidemiológicos y vacunales.

The human papillomavirus (HPV) is a necessary but insufficient cause of cervical cancer (CC). It is, the fourth leading cause of death in women worldwide. In our country, the incidence and mortality of CC is 30.6 and 16.7 per 100,000 women, respectively. Therefore, it is a public health problem. HPV can be of high oncogenic risk (HR-HPV), associated with cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and low oncogenic risk (HR-HPV), related to genital warts. The objective was to compare two diagnostic tests for HPV detection, real-time PCR and PCR followed by reverse hybridization, in the studied population. We selected 218 cervical samples from Paraguayan women analysed by real-time PCR (Abbott), then by PCR followed by reverse hybridization (CLART HPV2) which detects 35 HPV types. By the latter method, the most frequent types in single infections were HPV-16 and HPV-18, of the HR-HPVs. Among the HR-HPVs, HPV-53 was the most frequently detected and among the LR-HPVs, HPV-84. HPV-6 (LR-HPV) was detected in only one single sample and in 3 multiple infections. The concordance for HR-HPV detection, comparing both methods, was 78.44%, with a kappa coefficient of 0.50; 95% CI (0.38-0.62), similar to that reported in studies from other countries. This study provides PCR followed by reverse hybridization data in support of real-time PCR screening as genotyping monitors persistent type-specific infections that cause CIN as well as contributing to epidemiological and vaccine studies.