RT info:eu-repo/semantics/article
T1 Optimización de una técnica de PCR convencional para la amplificación de la región LCR y el gen E6 del virus del papiloma humano tipo 16
T2 Optimization of a conventional PCR technique for the amplification of the LCR region and the E6 gene of human papillomavirus type 16
A1 Díaz Ferreira, Natalia Jazmín
A1 Miranda Echagüe, Mabel Rocío
A1 Mercado Amarilla, María Alexandra
A1 Martínez Pereira, Iara Magaly
A1 Valenzuela Cáceres, Adriana Beatriz
A1 Mendoza Torres, Laura Patricia
A1 Mongelós Dacunte, Pamela Esther
A2 Universidad Nacional de Asunción. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud
AB El cáncer de cuello uterino es el cuarto cáncer más frecuente en mujeres en el mundo y a nivel mundial, el VPH 16 se encuentra presente en aproximadamente el 60% de los casos. A la fecha, las variantes de VPH 16 se clasifican en 4 linajes y 16 sublinajes asociándose algunas variantes con severidad de lesión. La secuenciación de la región LCR y del gen E6 es utilizada para la clasificación de variantes. Por ello, el objetivo fue optimizar 2 PCRs convencionales para detectar la región LCR y una PCR para el gen E6. Para ello, se utilizaron muestras positivas para VPH 16, cebadores específicos para la región LCR y el gen E6. Se probaron las reacciones a diferentes temperaturas de anillamientos. La concentración de MgCl2, dNTP y cebadores fueron determinadas siguiendo las recomendaciones del fabricante de la enzima ADN polimerasa utilizada. Para la amplificación de la región LCR y el gen E6 del VPH 16, se observaron mejores resultados a una temperatura de anillamiento de 57°C y 50°C, respectivamente. La concentración de MgCl2 utilizada en ambas reacciones fue de 1,5mM, la de dNTP 0,2mM y la de cebadores 0,2uM. La optimización de la reacción de PCR permitirá obtener amplicones aptos para secuenciación, a fin de determinar las variantes génicas y posteriormente evaluar funcionalidad y actividad transcripcional que puedan estar relacionadas con la patogénesis cervical.
PB Universidad Nacional de Asunción. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud
SN 1817-4620
YR 2022
FD 2022-08-01
LK http://hdl.handle.net/20.500.14066/4371
UL http://hdl.handle.net/20.500.14066/4371
LA spa
NO Díaz-Ferreira, N. J., Miranda-Echagüe, M. R., Mercado Amarilla, M. A., Martínez Pereira, I. M., Valenzuela Cáceres, A. B., Mendoza Torres, L. P., & Mongelós Dacunte, P. E. (2022). Optimización de una técnica de PCR convencional para la amplificación de la región LCR y el gen E6 del virus del papiloma humano tipo 16. Memorias del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, 20(2), 13–19. https://doi.org/10.18004/mem.iics/1812-9528/2022.020.02.13
NO Autor correspondiente: Pamela Mongelós. Universidad Nacional de Asunción, Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Departamento de Salud Pública. San Lorenzo Paraguay. Email: pamemongelos@hotmail.com
NO Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología
DS MINDS@UW
RD 29-jun-2024